申貝科學儀器

目的

為保證食品快速檢(jian)測方法評(ping)價工作科學合理、標準統(tong)一，特制(zhi)定本規范。

適用范圍

本(ben)規范(fan)適(shi)用(yong)于食品藥品監管部(bu)門組(zu)織開展的食品（含食用(yong)農(nong)產品）中農(nong)獸藥殘留、非法添加、真菌毒素、食品添加劑(ji)、污染物(wu)質等定性(xing)快速檢測(ce)方(fang)法及相關產品的技術評價。

評價指標

靈敏度

特異性

假陰性率和假陽性率

與參(can)比方法(fa)一致性分析

評價方法

低檢(jian)出水平(ping)（檢(jian)出限(xian)(xian)）設置對(dui)于(yu)禁用(yong)物質(zhi)或者(zhe)無殘留*的(de)物質(zhi)應小于(yu)或者(zhe)等于(yu)參(can)比(bi)方法的(de)檢(jian)出限(xian)(xian)水平(ping)，對(dui)于(yu)存在(zai)國家標準(zhun)限(xian)(xian)值規(gui)定(ding)的(de)物質(zhi)應小于(yu)或等于(yu)限(xian)(xian)值規(gui)定(ding)。所有參(can)數需要在(zai)不(bu)同種類或者(zhe)類型的(de)食品中測(ce)定(ding)的(de)實際結果進(jin)行統(tong)計。

靈敏度

靈敏度是指方法在實(shi)驗條件下(xia)達到的(de)實(shi)際低檢(jian)出水(shui)平時(shi)，檢(jian)出陽(yang)性(xing)結果的(de)陽(yang)性(xing)樣(yang)品數占(zhan)總陽(yang)性(xing)樣(yang)品數的(de)百分(fen)比，具體(ti)計(ji)算要求見附表，評價(jia)中可描(miao)述為(wei)該百分(fen)比下(xia)方法的(de)檢(jian)出限(xian)。

特異性

特異性(xing)是指方(fang)法在實驗(yan)條件下達到的(de)(de)實際(ji)低檢(jian)(jian)出(chu)(chu)水平(ping)時，檢(jian)(jian)出(chu)(chu)陰(yin)性(xing)結(jie)果的(de)(de)陰(yin)性(xing)樣(yang)品數占總陰(yin)性(xing)樣(yang)品數的(de)(de)百分比，具體(ti)計算要求見附表，評價中可描述(shu)為方(fang)法檢(jian)(jian)出(chu)(chu)限下不存在干擾(rao)的(de)(de)百分比。

假陰性率和假陽性率

假(jia)陰性(xing)(xing)率是指(zhi)方(fang)法在實驗條(tiao)件下達到(dao)的實際低檢出(chu)水平時，陽(yang)性(xing)(xing)樣品(pin)中檢出(chu)陰性(xing)(xing)結(jie)果(guo)的大概率（以百分(fen)比計），具體計算(suan)要(yao)求見附(fu)表，計算(suan)結(jie)果(guo)為方(fang)法大假(jia)陰性(xing)(xing)率的結(jie)果(guo)。

 假陽(yang)性(xing)率(lv)是(shi)指方(fang)法(fa)(fa)在實驗條(tiao)件下(xia)達(da)到的實際(ji)低(di)檢出(chu)水平時，陰性(xing)樣(yang)品中檢出(chu)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)(guo)的大(da)概(gai)率(lv)（以(yi)百分比計），具體計算(suan)要求見(jian)附(fu)表，計算(suan)結(jie)果(guo)(guo)為方(fang)法(fa)(fa)大(da)假陽(yang)性(xing)率(lv)的結(jie)果(guo)(guo)。

與參比方(fang)法一(yi)致性分(fen)析

快速檢(jian)測方法(fa)應與(yu)方法(fa)中規定的參比方法(fa)進行(xing)一(yi)致性比較(jiao)。與(yu)參比方法(fa)一(yi)致性分析(xi)統計(ji)方法(fa)常(chang)見卡方檢(jian)驗，具體(ti)可見附表中顯著性差異（c²）所示，一般：

c²=（½a-b½-1）²/（a+b）

a：樣品被(bei)待確認方(fang)法證實(shi)為陽性而(er)參比方(fang)法檢驗(yan)為陰性的數目；

b：樣品被待確認方(fang)法證實為陰性而(er)參比(bi)方(fang)法檢驗為陽(yang)性的(de)數目。

c²<3.84表示待確認方法與參比方法的陽性確證比率在95%的(de)置(zhi)信區間內沒有顯著性差(cha)(cha)異。但是(shi)如果待(dai)確認方(fang)法(fa)(fa)比(bi)參比(bi)方(fang)法(fa)(fa)存在(zai)更高的(de)回收率(lv)，則(ze)以(yi)上兩種方(fang)法(fa)(fa)的(de)陽性確證比(bi)率(lv)存在(zai)顯著性差(cha)(cha)異是(shi)可以(yi)接受的(de)。

c²>3.84表示兩種方法的陽性確認比率在95%的(de)置信區間內(nei)有顯(xian)著性差異。

如果(guo)能夠證實待確認(ren)方(fang)法靈敏度優于參(can)比(bi)方(fang)法，則(ze)兩種陽性比(bi)例的顯著性差(cha)異可以接(jie)受(shou)。

在考察與(yu)參比方法的(de)一致性分(fen)析中(zhong)，也需(xu)要考察在檢(jian)出限或(huo)者報告限度(du)水平附(fu)近(jin)的(de)檢(jian)測結果與(yu)濃度(du)之間的(de)趨勢(shi)一致性。

5　評價步驟

5.1　擬定評價技術方案

在比(bi)較快速檢(jian)測方(fang)(fang)法(fa)與待(dai)評(ping)價(jia)(jia)方(fang)(fang)法(fa)的(de)適(shi)用范圍(wei)、性(xing)(xing)能指標(biao)(biao)和(he)要求等(deng)符合性(xing)(xing)情況(kuang)的(de)基礎上(shang)，評(ping)價(jia)(jia)機(ji)構應針(zhen)對待(dai)評(ping)價(jia)(jia)食品快速檢(jian)測方(fang)(fang)法(fa)及(ji)相關產品制定(ding)評(ping)價(jia)(jia)方(fang)(fang)案。應包(bao)括但不(bu)限于：方(fang)(fang)案實施程序、評(ping)價(jia)(jia)內容及(ji)依據(ju)、評(ping)價(jia)(jia)比(bi)較用參(can)(can)考(kao)限值標(biao)(biao)準(zhun)及(ji)方(fang)(fang)法(fa)標(biao)(biao)準(zhun)、參(can)(can)考(kao)樣(yang)品制備、參(can)(can)考(kao)值選(xuan)擇、參(can)(can)考(kao)樣(yang)品定(ding)值及(ji)依據(ju)、參(can)(can)考(kao)樣(yang)品編碼及(ji)說明、測試程序、結(jie)果判(pan)斷及(ji)統(tong)計方(fang)(fang)式、結(jie)論出(chu)具(ju)等(deng)，終(zhong)結(jie)論的(de)出(chu)具(ju)應附相關判(pan)別(bie)依據(ju)，并給出(chu)相應判(pan)別(bie)指標(biao)(biao)。

盲樣制備

試驗評價需使用盲樣檢測進行。試驗評價盲樣涉及空白、陰性、陽性樣品等均應進行實驗室測定賦值，并出具均勻性和穩定性結果，相應盲樣的均勻性和穩定性測試結果計算的重復性相對標準偏差，應為參比方法要求對應濃度應符合重復性相對標準偏差的1/3。可使用(yong)有證標準物質(zhi)、參(can)(can)考物質(zhi)或者(zhe)質(zhi)量(liang)控制(zhi)品等進行溯(su)源參(can)(can)考，測定完成(cheng)后的(de)各類樣品應進行隨機(ji)編號(hao)處理，形成(cheng)盲樣。用(yong)于試驗評價的(de)盲樣或者(zhe)質(zhi)量(liang)控制(zhi)樣品，可自行制(zhi)備(bei)，應符合：

1)基質符(fu)合(he)性和(he)與(yu)實際食品(pin)樣(yang)品(pin)所含物質成分相似性；

2)考慮成分存在(zai)的濃度水平，應涵蓋涉及產品的檢出水平、標準(zhun)*值(zhi)（標準(zhun)規定值(zhi)）、對應標準(zhun)的檢出水平等(deng)，選擇多個水平進行(xing)測定；

3) 根(gen)據(ju)標準方法規定(ding)的食(shi)品(pin)(pin)類(lei)別或(huo)者評價(jia)范圍適(shi)用(yong)的食(shi)品(pin)(pin)，盲樣制備(bei)時應重(zhong)點考(kao)(kao)慮典型樣品(pin)(pin)基質(zhi)(zhi)或(huo)相似基質(zhi)(zhi)，結合(he)相關食(shi)品(pin)(pin)類(lei)別和測(ce)定(ding)目標物存(cun)在形式，按照食(shi)品(pin)(pin)宏觀組(zu)分(fen)(fen)進行區分(fen)(fen)，綜合(he)考(kao)(kao)慮蛋白(bai)、脂肪(fang)、水分(fen)(fen)、糖分(fen)(fen)、高聚物或(huo)者多聚體物質(zhi)(zhi)、色澤(ze)、酸堿性等(deng)影響檢測(ce)的組(zu)分(fen)(fen)進行區分(fen)(fen)選擇，必(bi)要(yao)時應按照食(shi)品(pin)(pin)生產工藝制備(bei)添加樣品(pin)(pin)；

4)對(dui)于(yu)多種(zhong)(zhong)成(cheng)分(fen)(fen)(fen)(fen)檢(jian)測，應(ying)選擇其(qi)分(fen)(fen)(fen)(fen)析成(cheng)分(fen)(fen)(fen)(fen)進(jin)(jin)行(xing)分(fen)(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)比較（結構(gou)類(lei)(lei)似程(cheng)度(du)、危害程(cheng)度(du)等），綜合選擇幾種(zhong)(zhong)代表性成(cheng)分(fen)(fen)(fen)(fen)進(jin)(jin)行(xing)評價(jia)；對(dui)于(yu)易于(yu)獲得的成(cheng)分(fen)(fen)(fen)(fen)組合，盡可能考(kao)慮全部進(jin)(jin)行(xing)試驗(yan)評價(jia)；

5)盲樣測(ce)定方式按照單(dan)位樣品量以及添(tian)加目標物的(de)(de)情況，樣品處(chu)理可以采(cai)用部分樣品、全量處(chu)理等方式進行(xing)。盲樣必須進行(xing)批(pi)內均(jun)勻(yun)性(xing)檢查，對于一定時間范圍內檢測(ce)的(de)(de)樣品，需要進行(xing)穩(wen)定性(xing)檢查，保證在(zai)評價期限內樣品穩(wen)定，以上均(jun)需評價機(ji)構提供檢測(ce)報告(gao)。

5.3　試驗測試

5.3.1 試驗(yan)評價可按照方(fang)(fang)法前期驗(yan)證結果(guo)（如(ru)有），進行濃(nong)度水(shui)平(ping)(ping)和基(ji)質設(she)計，應(ying)比較空白(bai)檢測(ce)、對照檢測(ce)、標準(zhun)方(fang)(fang)法平(ping)(ping)行對照檢測(ce)等(deng)內容，附帶(dai)考察方(fang)(fang)法操作環境、方(fang)(fang)法用(yong)時、操作難(nan)易等(deng)情況；對于多(duo)檢測(ce)規格產品，應(ying)根據其實際規格制定(ding)具(ju)體評價濃(nong)度范(fan)圍(wei)(wei)和水(shui)平(ping)(ping)，并在結果(guo)判斷中注明適用(yong)檢測(ce)范(fan)圍(wei)(wei)。

5.3.2 評(ping)價應(ying)進(jin)行(xing)雙盲(mang)檢(jian)(jian)測，對(dui)待(dai)評(ping)價食品(pin)快速檢(jian)(jian)測方(fang)(fang)法和(he)用于(yu)比較(jiao)的(de)參比方(fang)(fang)法平(ping)(ping)行(xing)利(li)用盲(mang)樣(yang)(yang)進(jin)行(xing)測試，并對(dui)樣(yang)(yang)品(pin)進(jin)行(xing)平(ping)(ping)行(xing)測定，分(fen)別計算(suan)獲(huo)得平(ping)(ping)均(jun)檢(jian)(jian)測結果，用于(yu)方(fang)(fang)法間一致(zhi)性評(ping)價，檢(jian)(jian)測過程中(zhong)(zhong)應(ying)利(li)用根據檢(jian)(jian)測物在食品(pin)中(zhong)(zhong)實際可能(neng)存在的(de)水平(ping)(ping)，設置質量控(kong)制樣(yang)(yang)品(pin)，考察檢(jian)(jian)測穩定性。實驗中(zhong)(zhong)測試樣(yang)(yang)品(pin)包(bao)括但不限于(yu)：

1) 食品基質空白樣品；

2) 測試水平一般應包括標準方法檢出水平（或者標準*值）的0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；或者方法標稱檢出限0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區分的水平（不少于3個）；

3) 依據相關分析檢測統計計量要求，一般檢測樣品每種基質空白及每個濃度水平不得少于50例，對于非法添加等重點項目的檢測，可考慮在低濃度水平設置為100例，以便更好地評價出假陽性率(lv)和假陰性率(lv)；

4) 如存在(zai)或易獲得，應進(jin)行陽性樣(yang)品復核測試；

5) 針(zhen)對多成分方(fang)法，每種典(dian)型(xing)物質均需有檢測結(jie)果和相(xiang)應評價(jia)參數結(jie)果；

6) 應給出差異比(bi)較結果，具備數值(zhi)的應有統(tong)計識別結論，統(tong)計方法(fa)可根據實際情況進行(xing)設定(ding)，但需說(shuo)明理由。

評價結果及報告出具

評價結果

評價結果應計算快速檢測方法可檢出限度水平的靈敏度、特異性、假陰性率、假陽性率以及檢測結果與參與方法的一致性。一般可考慮（但不限定）每個基質每個濃度水平應在數據采集數不少于50例情(qing)況(kuang)下，獲得假(jia)(jia)陰性率和假(jia)(jia)陽性率的結果。食品(pin)快(kuai)速檢(jian)測方(fang)法技術(shu)評價機構應根據(ju)項目實際情(qing)況(kuang)給出上(shang)述指標評價結果，并提供具有統計意義(yi)的說明。

報告出具

**技術評價機(ji)構應出(chu)具技術評價報告，對(dui)評價整(zheng)體情況和(he)結(jie)果進(jin)行匯總整(zheng)理和(he)分(fen)析，報告中(zhong)應有被評價的(de)食品快速檢測方法或(huo)(huo)相關產品是(shi)否符(fu)合(he)國(guo)家有關規定(ding)或(huo)(huo)產品標(biao)稱(cheng)的(de)結(jie)論。

附表：快速檢測方法(fa)性能指標計算表

附表

快速檢(jian)測方法性能指標(biao)(biao)計算表